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基礎信息Product information
產品名稱:

嗜吞噬細胞無形體核酸檢測試劑盒說明書

產品簡介:

嗜吞噬細胞無形體核酸檢測試劑盒說明書保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品型號:50T

廠商性質:經銷商

訪問量:376

更新時間:2021-06-11

產品特性Product characteristics

PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

規格

貨號

嗜吞噬細胞無形體核酸檢測試劑盒說明書

50T

HE60900-R


實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

8.公司產品僅用于科研。

(1RS)-1-(6-氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質K) (1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K) 77301-42-9 質量規格:美國進口  

6'-氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質 L) 6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L) 3900-45-6 質量規格:美國進口  

強力霉素鹽酸鹽 Doxycycline hydrochloride 100929-47-3 質量規格:美國進口  

強力霉素磺基水楊酸 Doxycycline ssa 369-95-9 質量規格:美國進口  

強力霉素??怂猁} Doxycycline Hyclate 564-25-0 質量規格:美國進口  

帕米磷酸二鈉鹽 Pamidronate, Disodium Salt 109552-15-0 質量規格:美國進口  

頭孢呋辛 Cefuroxime 55268-75-2 質量規格:美國進口  

頭孢他啶-d5 Ceftazidime-d5 72558-82-8 (unlabeled) 質量規格:美國進口  

Δ2-頭孢他啶 Δ2-Ceftazidime 217796-42-4 質量規格:美國進口  

頭孢他啶五水化合物 Ceftazidime Pentahydrate 78439-06-2 質量規格:美國進口  

頭孢唑啉 Cefazolin 25953-19-9 質量規格:美國進口  

17β-羧酸氟替卡松 Fluticasone 17β-Carboxylic Acid 28416-82-2 質量規格:美國進口  

環吡酮-d11 Ciclopirox-d11 29342-05-0 質量規格:美國進口  

環吡酮β-D-葡萄糖苷酸 Ciclopirox beta-D-Glucuronide 79419-54-8 質量規格:美國進口  

嗜吞噬細胞無形體核酸檢測試劑盒說明書小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Western 中分子量蛋白marker20次國產

豬去上腺素(NE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Western中低分子量蛋白Marker20次國產

大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  Westrrn Blot Loading ControlsWestrrn Blot/內參陽性對照100μg100μg

B細胞分化因子(BCDF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  WI-38(胚肺細胞)5×106cells/瓶×2

堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  WI38/VA13(SV-40Z轉化肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

維生素B12(VB12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  WISH(羊膜細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠apelin 12(AP12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  WM35, 黑色素瘤細胞

小鼠胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  WM451, 黑色素瘤細胞

大鼠氧化酶(XOD)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒  WPMY-1(正常前列腺基質永生化細胞)5×106cells/瓶×2

多聚血清蛋白(PHSA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  X光膠片100張國產

α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒  WTRL1(大鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2

 

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